Сравнительная оценка методов микрокристаллизации и спектрофотометрии для количественного анализа лишайниковых веществ в талломах

Full Text

Обоснование. Известно, что для определения лишайников используются довольно сложные морфологические, анатомические, биохимические методы. Однако есть довольно простой и быстрый «экспресс-метод» микрокристаллизации вторичных метаболитов лишайников, когда по форме кристаллов можно определить вид вещества. Благодаря содержанию в талломах лишайников вторичных метаболитов можно определить конкретный род или даже вид лишайника. Метод спектрофотометрии является более точным, но в то же время и более трудоемким и не всегда доступным для оценки качественного и количественного состава лишайниковых кислот.

Цель — выявить эффективность методов микрокристаллизации и спектрофотометрии для изученных видов лишайников.

Методы. Для количественной оценки вторичных метаболитов лишайников были использованы методы микрокристаллизации (из ацетоновых вытяжек) и спектрофотометрии (из хлороформовых вытяжек). При проведении микрокристаллизации капилляром берут каплю вещества из пробирки и перемещают на предметное стекло. После высыхания ацетона предметное стекло просматривают в микроскопе Микмед-6 на наличие кристаллов кислот [1]. Мы брали каплю получившегося экстракта из лишайника, капали на предметное стекло и просматривали на микроскопе под увеличением ×40, кроме секалоновой кислоты А — ее рассматривали под увеличением ×90.

Результаты. Оказалось, что для Cladonia fimbriata метод микрокристаллизации не подходит для корректной оценки содержания фумарпротоцетраровой кислоты, что может быть связано с низкой концентрацией вторичного метаболита и наличием обильных соредий, которые могли помешать как микрокристаллизации, так и спектрофотометрии. Для Evernia mesomorpha данные по обоим методам анализа сопоставимы. У Evernia prunastri содержание атранорина и усниновой кислоты можно достоверно оценить любым изученным нами методом, а содержание эверновой кислоты совпадает лишь на 75 ٪. Для Hypogymnia physodes точность метода микрокристаллизации составляет 73 ٪ у физодаловой кислоты, а у атранорина всего 66 ٪, что касается салациновой кислоты и атранорина у Parmelia sulcata, то здесь точность микрокристаллизации всего лишь 56 %. Для Physconia enteroxantha точность составляет 73 %, а у Xanthoria parietina — 75 %

Выводы. Исходя из полученных результатов можно сказать, что метод микрокристаллизации не подходит для количественного анализа лишайниковых веществ и лучше использовать спектрофотометрию, которая будет точнее и эффективнее. Метод микрокристаллизации можно порекомендовать как «экспресс-оценку» качественного состава вторичных метаболитов лишайников в их талломах, так как кристаллы различных лишайниковых кислот можно идентифицировать под микроскопом на предметном стекле.

About the authors

Самарский национальный исследовательский университет имени академика С.П. Королева

Author for correspondence.
Email: anastasiakasyanova@mail.ru

студентка, группа 4401-060301D, биологический факультет

Russian Federation, Самара

References

Supplementary files