<?xml version="1.0" encoding="UTF-8"?>
<!DOCTYPE root>
<article xmlns:mml="http://www.w3.org/1998/Math/MathML" xmlns:xlink="http://www.w3.org/1999/xlink" xmlns:xsi="http://www.w3.org/2001/XMLSchema-instance" xmlns:ali="http://www.niso.org/schemas/ali/1.0/" article-type="research-article" dtd-version="1.2" xml:lang="en"><front><journal-meta><journal-id journal-id-type="publisher-id">Vestnik of the Russian Agricultural Science</journal-id><journal-title-group><journal-title xml:lang="en">Vestnik of the Russian Agricultural Science</journal-title><trans-title-group xml:lang="ru"><trans-title>Вестник российской сельскохозяйственной науки</trans-title></trans-title-group></journal-title-group><issn publication-format="print">2500-2082</issn><issn publication-format="electronic">3034-5200</issn><publisher><publisher-name xml:lang="en">The Russian Academy of Sciences</publisher-name></publisher></journal-meta><article-meta><article-id pub-id-type="publisher-id">697482</article-id><article-id pub-id-type="doi">10.7868/S3034519725060053</article-id><article-categories><subj-group subj-group-type="toc-heading" xml:lang="en"><subject>Crop Production and Selection</subject></subj-group><subj-group subj-group-type="toc-heading" xml:lang="ru"><subject>Растениеводство и селекция</subject></subj-group><subj-group subj-group-type="article-type"><subject>Research Article</subject></subj-group></article-categories><title-group><article-title xml:lang="en">INTRODUCTION TO STERILE CULTURE <italic>IN VITRO</italic> OF HYBRID SEEDS FROM DISTANT CROSSES OF <italic>CITRUS RETICULATA</italic> BLAN.VAR <italic>UNCHIU</italic></article-title><trans-title-group xml:lang="ru"><trans-title>ВВЕДЕНИЕ В СТЕРИЛЬНУЮ КУЛЬТУРУ <italic>IN VITRO</italic> ГИБРИДНЫХ СЕМЯН ОТ ОТДАЛЕННЫХ СКРЕЩИВАНИЙ <italic>CITRUS RETICULATA</italic> BLAN. VAR <italic>UNCHIU</italic></trans-title></trans-title-group></title-group><contrib-group><contrib contrib-type="author"><name-alternatives><name xml:lang="en"><surname>Gvasaliya</surname><given-names>M. V</given-names></name><name xml:lang="ru"><surname>Гвасалия</surname><given-names>М. В</given-names></name></name-alternatives><bio xml:lang="en"><p>PhD in Biological Sciences, Senior Researcher</p></bio><bio xml:lang="ru"><p>кандидат биологических наук, старший научный сотрудник</p></bio><email>raisa.kulyan22@gmail.com</email><xref ref-type="aff" rid="aff1"/></contrib><contrib contrib-type="author"><name-alternatives><name xml:lang="en"><surname>Kulyan</surname><given-names>R. V</given-names></name><name xml:lang="ru"><surname>Кулян</surname><given-names>Р. В</given-names></name></name-alternatives><bio xml:lang="en"><p>PhD in Agricultural Sciences, Leading Researcher</p></bio><bio xml:lang="ru"><p>кандидат сельскохозяйственных наук, ведущий научный сотрудник</p></bio><email>raisa.kulyan22@gmail.com</email><xref ref-type="aff" rid="aff1"/></contrib><contrib contrib-type="author"><name-alternatives><name xml:lang="en"><surname>Kuleshov</surname><given-names>A. S</given-names></name><name xml:lang="ru"><surname>Кулешов</surname><given-names>А. С</given-names></name></name-alternatives><bio xml:lang="en"><p>PhD in Biological Sciences, Junior Researcher</p></bio><bio xml:lang="ru"><p>кандидат биологических наук, младший научный сотрудник</p></bio><email>raisa.kulyan22@gmail.com</email><xref ref-type="aff" rid="aff1"/></contrib></contrib-group><aff-alternatives id="aff1"><aff><institution xml:lang="en">Federal Research Center "Subtropical Scientific Center of the Russian Academy of Sciences"</institution></aff><aff><institution xml:lang="ru">Федеральный исследовательский центр «Субтропический научный центр Российской академии наук»</institution></aff></aff-alternatives><pub-date date-type="pub" iso-8601-date="2025-12-15" publication-format="electronic"><day>15</day><month>12</month><year>2025</year></pub-date><issue>6</issue><issue-title xml:lang="en">NO6 (2025)</issue-title><issue-title xml:lang="ru">№6 (2025)</issue-title><fpage>25</fpage><lpage>28</lpage><history><date date-type="received" iso-8601-date="2025-12-02"><day>02</day><month>12</month><year>2025</year></date></history><permissions><copyright-statement xml:lang="en">Copyright ©; 2025, Russian Academy of Sciences</copyright-statement><copyright-statement xml:lang="ru">Copyright ©; 2025, Российская академия наук</copyright-statement><copyright-year>2025</copyright-year><copyright-holder xml:lang="en">Russian Academy of Sciences</copyright-holder><copyright-holder xml:lang="ru">Российская академия наук</copyright-holder><license><ali:license_ref xmlns:ali="http://www.niso.org/schemas/ali/1.0/">http://creativecommons.org/licenses/by/4.0</ali:license_ref></license></permissions><self-uri xlink:href="https://vietnamjournal.ru/2500-2082/article/view/697482">https://vietnamjournal.ru/2500-2082/article/view/697482</self-uri><abstract xml:lang="en"><p>Breeding of citrus crops in Russia has been carried out at the Federal Research Center "Subtropical Scientific Center of the Russian Academy of Sciences" since 1994. As a rule, seeds from distant crosses of Citrus reticulaia Blau. var unchlu (mandarin) contain nucellar embryos and, rarely, a weak zygotic one. Nucellar seedlings are of great importance in breeding aimed at developing early-ripening varieties with high-quality fruits. When multi-embryonic seeds germinate in situ, one or two embryos usually develop, while the rest die due to lack of nutrients. In such a case, it is possible to save the embryos in vitro culture. Hybrid mandarin seeds obtained from 7 crossing combinations (C. reticulata 01-04 × 3252; C. reticulata 'Solnecbury' × pollen mixture; C. reticulata 98-9 × pollen mixture; C. reticulata 202-5 × pollen mixture; C. reticulata 204-1 × C. medica; C. reticulata 2025 × C. limon 'New Zealand'; C. reticulata 99-04 × C. medica) were introduced into sterile culture. The aim of the study was to develop a sterilization protocol, introduce seeds from distant crossing combinations into in vitro culture, and induce the growth of nucellar seedlings. The sterilization option (Domestos gel (5 min), 96% ethyl alcohol and fruit burning) showed a result with a higher yield of sterile culture — 96%. Contamination in the options was relatively low and varied from 4,0 to 16,7%. The percentage of seed germination on the Murashige and Skoog medium + 6-BAP (1,0 mg/l) + mesoinositol 100 (mg/l) was 63,1—87,2%. The highest seed germination was noted in the combination 98-9 × pollen mixture (87,2%). On average, 3—4 full-fledged nucellar seedlings without noticeable anomalies were obtained from 1 seed.</p></abstract><trans-abstract xml:lang="ru"><p>Селекцию с цитрусовыми культурами проводят в Федеральном исследовательском центре «Субтропический научный центр Российской академии наук» с 1994 года. В семенах от отдаленных скрещиваний Citrus reticulata Blan. var unchiu (мандарин) присутствуют нуцеллярные эмбрионы и редко слабый зиготический. Нуцеллярные сеянцы имеют большое значение в селекции цитрусовых, направленной на выведение раннеспелых сортов с высоким качеством плодов. При прорастании многозародышевых семян в условиях in situ обычно развивается один-два зародыша, остальные из-за недостатка питательных веществ погибают. В таком случае сохранить эмбрионы возможно в культуре in vitro. Гибридные семена мандарина, полученные от семи комбинаций скрещивания (C. reticulata 01-04 × 325; C. reticulata Coanevinia × смесь пыльцы; C. reticulata 98-9 × смесь пыльцы; C. reticulata 202-5 × смесь пыльцы; C. reticulata 204-1 × C. medica; C. reticulata 2025 × C. limon Новозеландский; C. reticulata 99-04 × C. medica) были введены в стерильную культуру in vitro. Цель исследования – разработка протокола стерилизации, введение в культуру in vitro семян от отдаленных комбинаций скрещивания, индукция роста нуцеллярных сеянцев. Вариант стерилизации (гель Доместос (5 мин.), 96% этиловый спирт и обжиг плода) показал результат с большим выходом стерильной культуры – 96%. Контаминация по вариантам была сравнительно низкой и варьировала в пределах от 4,0 до 16,7%. Процент всхожести семян на питательной среде Мурасиге — Скуга + 6-БАП (1,0 мг/л) + мезоинозит 100 (мг/л) составил 63,1–87,2%. Самая высокая схожесть отмечена в комбинации C. reticulata 98 – 9 × смесь пыльцы (87,2%). В среднем с семени было получено 3–4 полноценных, без заметных аномалий нуцеллярных сеянца.</p></trans-abstract><kwd-group xml:lang="en"><kwd>mandarin</kwd><kwd>hybridization</kwd><kwd>nucellar seedlings</kwd><kwd>sterilization protocol</kwd><kwd>sterile culture in vitro</kwd></kwd-group><kwd-group xml:lang="ru"><kwd>мандарин</kwd><kwd>гибридизация</kwd><kwd>нуцеллярные сеянцы</kwd><kwd>протокол стерилизации</kwd><kwd>стерильная культура in vitro</kwd></kwd-group><funding-group><funding-statement xml:lang="en">The study was carried out as part of the work of the Breeding and Seed Center for Subtropical, Citrus and Nut Crops of FRC SSC RAS, Agreement No. 075-15-2025-190 dated 17 April 2025.</funding-statement><funding-statement xml:lang="ru">Исследование выполнено в рамках работ Селекционно-семеноводческого центра субтропических, цитрусовых и орехоплодных культур ФИЦ СНЦ РАН, договор № 075-15-2025-190 от 17 апреля 2025 г.</funding-statement></funding-group></article-meta></front><body></body><back><ref-list><ref id="B1"><label>1.</label><mixed-citation>Гвасалия М.В. Модификация питательной среды для размножения микропобегов чая (Сamellia sinensis (L.) O. Kunze) культуре in vitro // Субтропическое и декоративное садоводство. 2025. № 92. С. 96–106. https://doi.org/10.31360/2225­3068­2025­92­96­107</mixed-citation></ref><ref id="B2"><label>2.</label><mixed-citation>Гвасалия М.В. Клональное микроразмножение растений чая в культуре in vitro // Вестник российской сельскохозяйственной науки. 2015. № 5. С. 36–37.</mixed-citation></ref><ref id="B3"><label>3.</label><mixed-citation>Кулян Р.В. Генетическое разнообразие цитрусовых растений по селекционно­значимым признакам // Вестник российской сельскохозяйственной науки. 2020. № 3. С. 47–51. https://doi.org/10.30850/vrsn/2020/3/47­51</mixed-citation></ref><ref id="B4"><label>4.</label><mixed-citation>Кулян Р.В. Хозяйственно­биологическая характеристика новых перспективных форм мандарина (Citrus reticulata Blan. var. unchiu Tan.) // Аграрный научный журнал. 2019. № 8. С. 24–28. https://doi.org/10.28983/asj.y2019i8pp24­28</mixed-citation></ref><ref id="B5"><label>5.</label><mixed-citation>Alka Jajoo In vitro propagation of citrus limonia osbeck through nucellar embryo culture // Current Research Journal of Biological Sciences. 2010. № 2. V. 1. P. 6–8.</mixed-citation></ref><ref id="B6"><label>6.</label><mixed-citation>Grosser J.W., Gmitter F.G. Protoplast fusion for production of tetraploids and triploids: applications for scion and rootstock breeding in citrus // Plant Cell, Tissue and Organ Culture. 2011. № 104. V. 3. P. 343–357. https://doi.org/10.1007/s11240­010­9833­2</mixed-citation></ref><ref id="B7"><label>7.</label><mixed-citation>Kepiro J.L., Roose M.L. Nucellar embryony. In: Citrus Genetics, Breeding and Biotechnology (ed. I.A. Khan). 20007. CABI. https://doi.org/10.1079/9781845931934.0000</mixed-citation></ref><ref id="B8"><label>8.</label><mixed-citation>Pérez­Tornero O. et al. In vitro conservation of citrus germplasm // Methods in Molecular Biology. 2020. № 2122. P. 145–160. https://doi.org/10.1007/978­1­0716­0342­0_11</mixed-citation></ref><ref id="B9"><label>9.</label><mixed-citation>Şenay Kurt, Fatma Koyuncu Characterization of Citrus × Poncirus embryo rescued hybrids as rootstock candidate using morphological markers // Horticultural Studies. 2024. Vol. 41. № 3. P. 90–100. https://doi.org/10.16882/hortis.1528207</mixed-citation></ref><ref id="B10"><label>10.</label><mixed-citation>Zhang X. et al. Advances in citrus breeding: from conventional techniques to biotechnological approaches // Horticulture Research. 2020. № 7. P. 115. https://doi.org/ 10.1038/s41438­020­00343­8</mixed-citation></ref></ref-list></back></article>
